آخرین بروز رسانی: 21ام مرداد, 1402

پروتکل و دستورالعمل بافرهای حاوی استیک اسید | Acetic acid buffers protocols

در زیست‌شناسی، اسید استیک (همچنین به نام اسید اتانوئیک) یک ترکیب آلی ساده با فرمول شیمیایی CH3COOH است. این یک اسید ضعیف است و به طور معمول در فرآیندها و ارگانیسم‌های زیستی مختلف یافت می‌شود. در زیر نقش‌ها و کاربردهای مهم اسید استیک در زیست‌شناسی آمده است:

متابولیسم سلولی: اسید استیک در متابولیسم سلولی دخیل است، به ویژه در فرآیند تبدیل کربوهیدرات‌ها، چربی‌ها و پروتئین‌ها به انرژی از طریق چرخه اسید سیتریک (همچنین به نام چرخه کربس یا چرخه .(TCA در طول این چرخه، اسید استیک با کوآنزیم A ترکیب شده و استیل‌کوآنزیم (Acetyl-CoA) Aتشکیل می‌دهد که وارد چرخه می‌شود و به تولید انرژی کمک می‌کند.

  1. حامل گروه استیل: اسید استیک گروه‌های استیل CH3CO- را تأمین می‌کند که نقش‌های ضروری در واکنش‌های زیست‌شیمیایی مختلف، مانند استیله‌سازی، ایفا می‌کنند. استیله‌سازی شامل اضافه کردن گروه‌های استیل به پروتئین‌ها و سایر مولکول‌ها می‌شود که تأثیرات آنها را بر عملکردها، محل زندگی و تعاملاتشان تأثیر می‌گذارد.
  2. تنظیم pH: اسید استیک در سیستم‌های زیستی به عنوان یک اسید ضعیف حاضر است که می‌تواند به عنوان یک بافر عمل کند و به حفظ pH پایدار در داخل سلول‌ها و مایعات زیستی کمک کند. این می‌تواند پروتون‌ها H+ را که اهدا کرده یا بپذیرد و اسیدیته محیط‌های سلولی را تنظیم کند.
  3. تخمیر: اسید استیک به عنوان نتیجه‌ای از فرآیندهای تخمیر، به ویژه در تولید سرکه، تولید می‌شود. برخی از باکتری‌ها، مانند Acetobacter، می‌توانند اتانول را در حضور اکسیژن به اسید استیک اکسیده کنند.
  4. مولکول انتقالی: اسید استیک می‌تواند در برخی از واکنش‌های زیستی به عنوان یک مولکول انتقالی عمل کند. به عنوان مثال، در برخی از میکروارگانیسم‌ها، تولید اسید استیک می‌تواند بر روی بیان ژن‌های خاص و به دست آوردن واکنش‌های استرس تأثیر بگذارد.
  5. واکنش‌های شیمیایی: اسید استیک در تکنیک‌های زیست‌شیمیایی و زیست‌شناسی مولکولی مختلف مورد استفاده قرار می‌گیرد. به طور معمول در پروتکل‌های استخراج DNA و RNA، و همچنین در روش‌های رنگ‌آمیزی هیستولوژیک استفاده می‌شود.
  6. ارتباط سلولی: در برخی از حشرات اجتماعی، مانند مورچه‌ها و زنبورها، اسید استیک به عنوان فرومون برای ارتباط استفاده می‌شود. این می‌تواند اطلاعاتی در مورد منابع غذایی، نشانه‌های هشدار و تشخیص شناسایی مستعرض ارسال کند.
  7. حفظ شیمیایی: گاهی اوقات اسید استیک به عنوان یک ثابت کننده یا حافظه در آماده‌سازی نمونه‌های بیولوژیکی برای میکروسکوپی و هیستولوژی استفاده می‌شود.

در کل، اسید استیک نقش‌ها و کاربردهای متنوع و ضروری در فرآیندهای زیستی را از تولید انرژی تا تنظیم و ارتباطات سلولی دارد. حضور و وظایف اسید استیک برای عملکرد صحیح ارگانیسم‌های زنده حیاتی است.

در زیست‌شناسی، اسید استیک (همچنین به نام اسید اتانوئیک شناخته می‌شود) به دلیل ویژگی‌های شیمیایی و تعاملات در سیستم‌های زیستی، چندین کاربرد و کاربرد مهم دارد:

۱. هیستولوژی و میکروسکوپی: اسید استیک به طور معمول به عنوان یک ثابت‌کننده یا حافظه در آماده‌سازی نمونه‌های هیستولوژیک و میکروسکوپی استفاده می‌شود. این کمک می‌کند تا ساختار سلول‌ها و بافت‌ها برای بررسی تحت میکروسکوپ حفظ شود.

۲. استخراج DNA و RNA: اسید استیک گاهی اوقات در پروتکل‌های استخراج DNA و RNA برای کمک به لیز سلول‌ها و تبدیل پروتئین‌ها به حالت تخریبی مورد استفاده قرار می‌گیرد، که از طریق آزاد سازی اسیدهای نوکلئیک از نمونه کمک می‌کند.

۳. رنگ‌آمیزی: اسید استیک در تکنیک‌های مختلف رنگ‌آمیزی برای جزئیات سلولی مانند هسته‌ها و کروموزوم‌ها در سلول‌های گیاهی و حیوانی استفاده می‌شود.

۴. بافر کردن: اسید استیک می‌تواند به عنوان یک عامل بافر در آزمایش‌های زیستی خاص به منظور حفظ pH پایدار و ایجاد محیط مناسب برای واکنش‌های آنزیمی استفاده شود.

۵. مهار آنزیمی: اسید استیک می‌تواند فعالیت برخی از آنزیم‌ها را مهار کند که می‌تواند در آزمایش‌ها یا آزمایش‌های خاص مفید باشد.

۶. خالص سازی و جدا سازی: اسید استیک در تکنیک‌های خالص سازی و جداسازی پروتئین برای کمک به جدا کردن و جدا کردن اجزاء مختلف بر اساس حلالیت و تعاملات استفاده می‌شود.

۷. واکنش‌های استیلاسیون: اسید استیک در واکنش‌های استیلاسیون دخالت دارد، جایی که گروه‌های استیل به پروتئین‌ها، لیپیدها یا دیگر مولکول‌ها اضافه می‌شود و تأثیری بر عملکرد، پایداری یا محلولشان دارد.

۸. کشت سلول و نگهداری سلول: اسید استیک می‌تواند در محیط‌های کشت سلولی برای تنظیم pH و ایجاد شرایط رشد مناسب برای برخی از انواع سلول‌ها استفاده شود.

۹. مسیرهای متابولیک: اسید استیک بخشی از مسیرهای متابولیک، از جمله چرخه اسید سیتریک، است که به تولید انرژیATP  کمک می‌کند.

۱۰. فرآیندهای میکروبی: اسید استیک توسط برخی از میکروارگانیسم‌ها در فرآیندهای تخمیر، مانند تولید سرکه، تولید می‌شود.

مهم است به این نکته اشاره کنیم که اسید استیک ترکیبی با بوی قوی و خورنده است، بنابراین استفاده از آن در آزمایش‌های زیستی باید با دقت و در غلظت‌های مناسب انجام شود. کاربردها و غلظت‌های خاص اسید استیک در زیست‌شناسی بستگی به اهداف آزمایش، نوع نمونه و نتایج مطلوب دارد.

نحوه آماده سازی استیک اسید 0.2 مولار:

اسید استیک (0.2 M)

اسید استیک گلاسیال

0.12 میلی لیتر اسید استیک گلاسیال به 9.88 میلی لیتر H2O اضافه کنید.

نحوه آماده سازی محلول استیک اسید ثابت کننده و متوقف کننده آزمایش:

اسید استیک، 1٪ (v/v)

اتانول، 5% (v/v)

نحوه آماده سازی محلول اسید استیک / استونیتریل:
اسید استیک (0.1 M)

استونیتریل

0.1 مولار اسید استیک و استونیتریل را به نسبت 3:1 (v/v) ترکیب کنید.

نحوه آماده سازی محلول استیک انیدرید-TEA:

غلظت مورد نیاز مقدار برای 875mL مواد تشکیل دهنده
(v/v)71% 625ml Acetic anhydride
29mM 259ml Triethanolamine (TEA; 0.1 M)

مقالات مرتبط رو حتما ببینید

نظر شما برای ما با ارزشه

0 دیدگاه