محلول هضم با ترکیب سیستئین/کلرید و فسفات سدیم در زیست‌شناسی برای فرآیند هضم نمونه‌های بیولوژیکی استفاده می‌شود. این نوع بافر هضم، به ویژه در فرآیندهایی مانند تفسیر پروتئین، استخراج DNA و تفسیر ژنی بکار می‌رود.
در اینجا چند کاربرد این بافر هضم در زیست‌شناسی آمده است:
۱. تفسیر پروتئین: برای هضم پروتئین‌ها به طوری که به آنزیم‌های پروتئولیتیک حساس باشند، این نوع بافر هضم ممکن است استفاده شود. با افزودن آنزیم‌های پروتئولیتیک مانند پروتئیناز K یا تریپسین به محلول، پروتئین‌ها هضم و به پپتید‌های کوچک‌تر تجزیه می‌شوند. این پپتید‌ها سپس می‌توانند برای تفسیر و شناسایی در آزمایشات مختلف به کار روند.
۲. استخراج :DNAبرای استخراج DNA از نمونه‌های بیولوژیکی مانند سلول‌ها یا بافت، این بافر هضم ممکن است استفاده شود. آنزیم‌های هضمی می‌توانند دیواره‌های سلولی را تجزیه کرده و به دی‌ان‌ای رسانه‌ها، کروماتین‌ها و در نهایت به دی‌ان خام ترکیبات آن را انتقال دهند.
۳. تفسیر ژنی: در مطالعات تفسیر ژنی، استفاده از بافر هضم با ترکیب سیستئین/کلرید و فسفات سدیم ممکن است در فرآیند تجزیه و تحلیل ژنومی به منظور شناسایی مناطق خاص و تشخیص تغییرات ژنتیکی مورد استفاده قرار گیرد.
این فهرست تنها چند نمونه از کاربردهای ممکن این بافر هضم در زیست‌شناسی است. ترکیب و شرایط دقیق برای استفاده از بافر هضم بسته به نوع نمونه و هدف آزمایش ممکن است متفاوت باشد و نیازمند بهینه‌سازی و تجربه عملی است.
| غلظت مورد نیاز | مواد تشکیل دهنده |
|---|---|
| 20mM | Na-phosphate |
| 20mM | cysteine/HCl buffer (pH 7.0) |
| 10mM | EDTA |
EDTA (اتیلن دی آمن تتراستیک اسید)
NaOH
برای تهیه EDTA در 0.5 مولار (pH 8.0): 186.1 گرم دی سدیم EDTA•2H2O را به 800 میلی لیتر H2O اضافه کنید. روی همزن مغناطیسی به شدت هم بزنید. pH را با NaOH (~20 گرم گلوله NaOH) روی 8.0 تنظیم کنید. به مقدار کمی بریزید و با اتوکلاو استریل کنید. نمک دی سدیم EDTA تا زمانی که PH محلول با افزودن NaOH به 8.0 ~ تنظیم نشود وارد محلول نمی شود.
مقالات مرتبط رو حتما ببینید
نظر شما برای ما با ارزشه
0 دیدگاه
