دی تیو تری تول (دی ت ت) | DTT-Dithiothreitol

دی تیو تری تول (دی ت ت) | DTT-Dithiothreitol

1،4-dithiothreitol معمولاً به عنوان معرف Cleland شناخته می شود. این ماده گروه های تیول را محافظت می کند و پیوندهای دی سولفید موجود در پپتیدها و پروتئین ها را احیا می کند. این ماده پیوندهای دی سولفید را به گروه سولفیدریل احیا می کند و معمولاً در مطالعات رسپتور برای تعیین اهمیت عملکردی پیوندهای سولفید در طول اشغال و عملکرد گیرنده استفاده می شود. همچنین مونوتیولها را در حالت کاملا احیا شده حفظ می کند.

1،4-dithiothreitol در موارد زیر استفاده می شود:

• جداسازی ، خالص سازی و تعیین خصوصیات پروتئین ها و آنزیم ها
• اندازه گیری فعالیت های آنزیم (فعال سازی مجدد آنزیم ها)
• شناسایی گروه های دی سولفید در پروتئین ها و آنزیم ها
• استخراج DNA قبل از تکثیر

یک معرف عالی برای حفظ گروه های SH در حالت احیا. DTT در بافرهای نمونه برای احیا پیوندهای دی سولفید پروتئین قبل از SDS-PAGE کاربرد دارد. DTT همچنین می تواند برای از بین بردن ماتریکس ژل پلی آکریل آمید استفاده شود. DTT سمیت کمتری نسبت به 2-مرکاپتواتانول دارد. به طور معمول ، غلظت هفت برابر کمتر از DTT  ( 100 میلی مولار) نسبت به 2-مرکاپتواتانول (5 درصد حجمی ، 700 میلی مولار) در ژل پلی اکریل امید استفاده می شود.

1,4-dithiothreitol is commonly known as Cleland′s reagent. It confers protection to thiol groups and reduces disulfide bonds in peptides and proteins. It reduces disulfide bonds to sulfhydryl group and is commonly used in receptor studies, to determine the functional importance of disulfide bonds during receptor occupancy and functionality. It also maintains monothiols completely in the reduced state.

1,4-dithiothreitol is used in:

• Isolation, purification and characterization of proteins and enzymes
• Measurement of enzyme activities (reactivation of enzymes)
• Determination of disulfide groups in proteins and enzymes
• DNA extraction prior to amplification

An excellent reagent for maintaining SH groups in reduced state; quantitatively reduces disulfides. DTT is effective in sample buffers for reducing protein disulfide bonds prior to SDS-PAGE. DTT can also be used for reducing the disulfide bridge of the cross-linker N,N′-bis(acryloyl)cystamine to break apart the matrix of a polyacrylamide gel. DTT is less pungent and is less toxic than 2-mercaptoethanol. Typically, a seven fold lower concentration of DTT (100 mM) is needed than is used for 2-mercaptoethanol (5% v/v, 700 mM).