مستر میکس چیست؟

PCR  (واکنش زنجیره ای پلیمراز) یک روش انقلابی است که توسط کری مولیس در دهه 1980 توسعه یافت. PCR مبتنی بر استفاده از توانایی DNA پلیمراز برای سنتز رشته جدید DNA مکمل رشته الگوی ارائه شده است. از آنجایی که DNA پلیمراز می تواند یک نوکلئوتید را فقط به یک گروه 3′-OH از قبل موجود اضافه کند، به یک پرایمر نیاز دارد که بتواند اولین نوکلئوتید را به آن اضافه کند. در پایان واکنش PCR، توالی خاص مورد نظر در میلیاردها نسخه (آمپلیکون) انباشته می شود.

• جهت خرید مستر میکس پی سی آر کیاژن فناور یا دریافت قیمت مستر میکس پی سی آر کیاژن کلیک کنید.
• جهت خرید One Step Real time PCR Master Mix کیاژن یا دریافت قیمت One Step Real time PCR Master Mix کیاژن فناور کلیک کنید.
• جهت خرید 2xTaq Master Mix | مسترمیکس تگ کیاژن فناور یا دریافت قیمت 2xTaq Master Mix | مسترمیکس تگ کیاژن کلیک کنید.
• جهت خرید مسترمیکس پی اف یو | 2xPfu Master Mix کیاژن یا دریافت قیمت مسترمیکس پی اف یو |  2xPfu Master Mix کیاژن فناور کلیک کنید.
• جهت خرید مستر میکس پروب | 2xProbe Taq Master Mix کیاژن فناور یا دریافت قیمت مستر میکس پروب |  2xProbe Taq Master Mix کیاژن کلیک کنید.

مستر میکس، که گاهی اوقات به عنوان سوپر مستر میکس یا مستر میکس آماده شناخته می شود، مخلوط دسته ای از معرف های PCR در غلظت های بهینه است که می تواند بین بسیاری از لوله های PCR یا صفحات PCR که دارای تعدادی چاهک هستند، تقسیم شود. مستر میکس محققان را قادر می‌سازد تا واکنش‌های کنترلی خود را به درستی تنظیم کرده وغلظت‌های مختلف الگوهای DNA یا RNA هدف خود را بدون نیاز به افزودن مقادیر دقیق آنزیم‌ها، بافرها، کوفاکتور (معمولاً )، آب وdNTP به هر ویال واکنش یا چاه صفحه آزمایش کنند. در عوض، یک مستر میکس کامل حاوی تمام یا بیشتر معرف های PCR بوده که کمک می‌کند اجزاء آزمایش به یک باره تهیه شوند. مقدار مناسبی از مخلوط اصلی را می توان در لوله ها یا چاهک های صفحه ای پیپت کرد و با هر جزء که در واکنش ها متفاوت است، مانند الگوهای DNA یا RNA یا پرایمرها ترکیب کرد.

چرا مستر های انزیمی جایگزین مواد وانزیم ها شده اند؟

تنظیم یک واکنش PCR ممکن است ساده به نظر برسد، اما اینچنین نیست. محاسبه صحیح مقادیر مورد نیاز معرف های مخلوط اصلی برای بدست آوردن حجم مناسب، در غلظت مناسب، اولین چالش است.

پس از انجام این کار، معرف‌ها باید با هم مخلوط شوند. مشکل این است که مایعات معمولاً باید خنک شوند واغلب بسیار چسبناک هستند ودر مقادیر کم مورد نیاز هستند. علاوه بر این، کار باید به صورت متمرکز انجام شود، زیرا حواس‌پرتی یا وقفه‌ها می‌تواند به سرعت منجر به وضعیتی شود که دیگر نمی‌دانید کدام معرف‌ها قبلاً به ترکیب اصلی اضافه شده‌اند. هنگام پر کردن ویال‌های آزمایش PCR وافزودن DNA الگو، به‌ویژه هنگام استفاده از پیپت‌های متعدد، خطاهایی مانند پرش از یک ویال یا چاه نیز می‌تواند به راحتی رخ دهد. از آنجایی که اشتباهات پیپتینگ را نمی توان به طور کامل رد کرد، باید اجزای اصلی مخلوط را به ترتیب قیمت آنها اضافه کرد واز مقرون به صرفه ترین معرف مواد را اضافه کرد. به این ترتیب، اگر از نو شروع کنید، پول کمتری را هدر خواهید داد.

آخرین واحتمالا بزرگترین چالش این است که واکنش های PCR خود را از آلودگی پاک نگه دارید. PCR یک روش بسیار حساس است که می تواند تعداد زیادی کپی از اسید نوکلئیک را از مقدار کمی ماده اولیه ایجاد کند، بنابراین آلودگی آمپلیکون و نمونه می تواند یک مشکل بزرگ باشد.

به همین دلیل با جایگزینی مسترها که تمامی ترکیبات مورد استفاده در واکنش در محلول مستر وجود دارد، خطای آزمایش کاهش یافته وانجام آزمایش راحت تر شده است.

معایب ومزایای استفاده از یک مستر انزیمی چیست؟

ترکیب اصلی PCR سرعت، حساسیت، ویژگی و بازده بالاتری را ارائه می‌کند، حتی زمانی که واکنش در شرایط سخت مانند توالی‌های هدف یا الگوهای DNA چالش برانگیز انجام می‌شود. آنها کنترل بیشتری بر روی تولید محصولات خاص PCR ارائه می‌دهند واز تکرارپذیری محصولات ناخواسته جلوگیری می کنند.

برخی دیگر از مزایای استفاده از ترکیب اصلی PCR در زیر ذکر شده است:

علیرغم اندازه گیری واضافه کردن همه مواد شیمیایی به صورت جداگانه، مخلوط اصلی PCR یک محلول از پیش مخلوط شده با تمام اجزای لازم در غلظت های بهینه برای اجرای برنامه های PCR ارائه می دهد.

مستر باعث صرفه جویی در زمان آماده سازی واکنش های PCR می شود.

مستر حداکثر سازگاری را هنگام تهیه فرمول PCR، حتی در حین انجام یک سنجش با حجم بالا، تضمین می کند.

استفاده از مستر PCR مراحل پیپت را کاهش می دهد ودر نتیجه احتمال آلودگی را کاهش می دهد.

از آنجایی که تمام اجزای PCR قبلاً در مستر PCR اضافه شده‌اند، احتمال خطاهایی را که در غیر این صورت به دلیل یک جزء از دست رفته در هنگام تهیه فرمولاسیون PCR ایجاد می‌شوند، کاهش می‌دهد.

استفاده از مستر تنوع را در بین همه ویال‌ها کاهش می دهد، که می تواند در هنگام آماده سازی محلول به صورت دستی رخ دهد.

ترکیب اصلی PCR تجاری موجود تحت کنترل کیفیت وروش‌های تجزیه وتحلیل قرار می‌گیرد که تکرارپذیری محصولات PCR قابل اعتماد ودقیق را تضمین می‌کند.

از معایب استفاده از مستر در حین پیپت کردن برای برداشت مقدار لازم از محلول وافزودن آن از ویال اصلی به ویال آزمایش می باشد. به دلیل تبخیر، چسبیدن به نوک یا عدم دقت پیپت ممکن است مقداری از ترکیب مستر میکس از بین برود.

مسترها از چه موادی تشکیل میشوند؟

یک مستر از یک آنزیم مثلا یک DNA پلیمراز، بافرهای واکنش بهینه، dNTPs و  تشکیل شده است. ترکیب اصلی معمولا شامل DNA پلیمراز پایدار در برابر حرارت، واحدهای سازنده DNA (dNTPs)،  وهمچنین تقویت کننده‌ها و تثبیت کننده ها در بافری ویژه برای حفظ pH بهینه، نمک ها است که برای تولید DNA محصول توسط PCR بهینه شده است. نمک‌ها ویون‌های منیزیم کوفاکتورهای مورد نیاز برای عملکرد بهینه پلیمراز هستند. پس از دریافت یک مستر میکس، فقط باید اجزای زیر را قبل از ادامه آزمایشات PCR خود اضافه کنید:

• پرایمرها (فوروارد و ریورس)
• DNA الگو
• رنگ تشخیصی یا پروب فلوروفور (فقط در صورت نیاز)

انواع مستر میکس ها کدامند؟

طیفی از مستر PCR متناسب با سیستم های مختلف PCR، از جمله PCR استاندارد، RT-PCR، و RT-qPCR در دسترس است. مسترتجاری انتخاب شده با اندازه یا نوع مناسب الگوی DNA بهترین کارایی را دارد. به عنوان مثال، برخی از تولیدکنندگان مستری را ارائه می‌کنند که برای تولید آمپلیکون‌های DNA، از 0.2 تا 2 Kb کار می‌کند. برخی فقط برای آمپلیکون های غنی از GC کار می‌کنند یا یک آمپلیکون 5-6 کیلوبایتی را تولید می کنند. در زیر برخی از انواع مستر PCR که به صورت تجاری در دسترس هستند وویژگی های متمایز آن‌ها آورده شده است.

High-Fidelity PCR: ترکیبی از یک سیستم PCR با کیفیت بالا و  متناسب با درجه PCR، dNTPs، و یک بافر واکنش بهینه شده به یک محصول آماده استفاده با غلظت دو برابر می‌باشد.

مستر PCR عادی: مناسب برای تکثیر یک قطعه DNA به اندازه تقریباً 5 کیلوبایت ودارای محتوای GC 40-60٪. همچنین بر اساس هدف اجرای سیستم PCR به دو زیر دسته تقسیم می شود.

Hot start Taq: فقط می‌تواند در دمای خاص عمل کند و برای جلوگیری از تشکیل محصول PCR ناخواسته در دمای بالاتر استفاده می‌شود.

High-Fidelity Taq: حاوی برخی از آنزیم‌های تخصصی است که می‌توانند آمپلیکون‌های تا 20 کیلوبایت را تولید کنند.

مستر میکس Real-time qPCR: برای آزمایش‌های Real-time qPCR مستر میکس‌ها به گونه‌ای طراحی شده‌اند که از مزایای شیمی تشخیص رنگ وپروب استفاده کنند. برخی از مستر میکس ها از قبل با رنگی مانند SYBR Green یا پروب دارای برچسب فلوروفور همراه هستند. اما اگر به اینگونه نباشد، می توانید رنگ مورد نظر را قبل از استفاده در مستر اضافه کنید. اغلب، برخی از ابزارهای PCR به رنگ مرجع غیرفعال، مانند ROX، برای انجام Real-time PCR نیاز دارند. بنابراین، لازم است قبل از خرید میکس اصلی، نیازهای سیستم خود را بدانید.

• جهت خرید مستر میکس پی سی آر کیاژن فناور یا دریافت قیمت مستر میکس پی سی آر کیاژن کلیک کنید.
• جهت خرید One Step Real time PCR Master Mix کیاژن یا دریافت قیمت One Step Real time PCR Master Mix کیاژن فناور کلیک کنید.
• جهت خرید 2xTaq Master Mix | مسترمیکس تگ کیاژن یا دریافت قیمت 2xTaq Master Mix | مسترمیکس تگ کیاژن فناور کلیک کنید.
• جهت خرید مسترمیکس پی اف یو | 2xPfu Master Mix کیاژن فناور یا دریافت قیمت مسترمیکس پی اف یو |  2xPfu Master Mix کیاژن کلیک کنید.
• جهت خرید مستر میکس پروب | 2xProbe Taq Master Mix کیاژن یا دریافت قیمت مستر میکس پروب |  2xProbe Taq Master Mix کیاژن فناور کلیک کنید.

مستر میکس‌های تجاری هنوز قبل از استفاده نیاز به آماده سازی دارند، که DNA یا RNA الگو به آن‌ها اضافه گردد. مسترها قبل از استفاده ممکن است به ذوب، سرد کردن، رقیق شدن با آب هم درجه PCR و مخلوط کردن از طریق پیپت یا سانتریفیوژ نیاز داشته باشند. قبل از انجام آزمایش باید اطمینان حاصل کرد که مستر میکس درست متناسب با نیازهای آزمایش انتخاب شود.

مسترمیکس‌های PCR تجاری به صورت مایع ولیوفیلیزه در دسترس هستند. مخلوط فرم مایع باید در دمای بین 20- تا 4 درجه سانتیگراد نگهداری شود ومعمولاً ارزان تر از مخلوط های لیوفیلیزه یا خشک شده یخ زده است. مخلوط های اصلی PCR لیوفیلیزه را می توان در دمای محیط برای مدت طولانی تری نگهداری کرد. علاوه بر این، حمل ونقل آنها آسان است ودر حین اجرای PCR، محلول فقط باید در محلول بافری که با مخلوط اصلی ارائه می شود، آماده سازی شود.

چرا در ابتدای نام برخی از مستر ها از نام 2x استفاده می‌کنند؟

یک رقت دو برابر، غلظت محلول را دو برابر می کند که غلظت نهایی را به نصف کاهش می دهد. یعنی هنگامی که واکنش را آماده می کنید، نسبت ترکیب اصلی به سایر معرف ها باعث می شود که مستر در غلظت نهایی 1 برابر شود. فقط باید به خاطر داشت که نیمی از حجم نهایی واکنش شما باید مستر میکس PCR باشد. علاوه بر این، فقط باید پرایمرها و DNA الگو به ویال واکنش اضافه شود و با آب نوکلئاز فری به حجم نهایی مورد نظر برسد. به طور خلاصه باید با اضافه کردن بقیه موارد غلظت نهایی را از ۲ برابر به ۱ برابر رقیق کنید.

مستر 2X Taq Master Mix چیست و چه کاربردهایی دارد؟

Taq 2X Master Mix یک محلول بهینه‌ی آماده برای استفاده است که حاوی Taq DNA Polymerase، dNTPs، ، KCI و تثبیت کننده‌ها می‌باشد. این محصول به طور ایده آل برای برنامه‌های PCR عادی از الگوها از جمله محلول های DNA خالص، کلونی های باکتری ومحصولات cDNA مناسب است. این فرمول از پیش مخلوط شده به دلیل کاهش نیاز به پیپتینگ مورد نیاز برای انجام واکنش PCR، باعث صرفه جویی در زمان وکاهش آلودگی می شود. عملکرد این مستر تکثیر قطعات DNA از 4 کیلو بایت DNA ژنومی پیچیده تا 5 کیلوبایت، با توان عملیاتی بالا می‌باشد.

Taq DNA Polymerase یک آنزیم با استاندارد صنعتی است. آن را به دلیل پایداری حرارتی نسبتا کم (نیمه عمر 45 دقیقه در 94 درجه سانتیگراد) وفقدان یک دامنه اگزونوکلئاز تصحیح کننده برای استفاده محدود می کند. این ویژگی ها آن را برای کار بر روی الگئهای طولانی (> 5 کیلوبایت)، با ساختار ثانویه پیچیده، یا در برنامه هایی که سعی در به حداقل رساندن خطا دارند، انتخاب نامناسب می‌کند. میزان خطای Taq DNA Polymerase در واکنش  خطا در هر نوکلئوتید در هر چرخه است. بر این اساس، دقت واکنش با Taq DNA Polymerase به میزان  است.

نکات قابل توجه:

1. Taq 2X Master Mix باید در غلظت 1x با الگوی DNA و پرایمرها در حجم کلی واکنش 25 یا 50 میکرولیتر استفاده شود.
2. Taq 2X Master Mix زمانی که در دمای 20- درجه سانتی گراد نگهداری می شود برای پانزده دوره انجماد و ذوب پایدار است.
3. Taq 2X Master Mix همچنین به مدت سه ماه در دمای 4 درجه سانتیگراد پایدار است، بنابراین برای استفاده مکرر، میزان‌های تقسیم شده در دمای 4 درجه سانتیگراد مناسب می‌باشد.

• جهت خرید مستر میکس پی سی آر کیاژن فناور یا دریافت قیمت مستر میکس پی سی آر کیاژن کلیک کنید.

مستر 2X Pfu Master Mix چیست و چه کاربردهایی دارد‌ ؟

سویه E. coli بیان کننده ژن Pfu DNA Polymerase از Pyrococcus furiosus می‌باشد. Pfu DNA polymerase یک DNA پلیمراز پایدار در برابر حرارت است که دارای فعالیت های 5’→ 3′ DNA polymerase و 3’→ 5′ exonuclease (تصحیح اشتباه هنگام سنتز رشته محصول) است. این پلیمراز حساسیت و توان عملکردی بالاتری را با نرخ خطای ده برابر کمتر از Taq DNA پلیمراز داشته  و به دلیل کاهش تعداد مراحل پیپت، باعث صرفه جویی در زمان و کاهش آلودگی می شود.به هنگام استفاده توانایی عملکردی بالا داشته و برای توالی‌های غنی از GC یا ساختارهای ثانویه مشکل‌ساز، واکنش‌های گسترش پرایمر در دماهای بالا و کلون سازی محصولات انتهای صاف توصیه می‌شود. پایدار در دمای 4 درجه سانتیگراد به مدت 6 ماه، اجازه می دهد تا واکنش فوری بدون نیاز به ذوب شدن محلول انجام پذیرد.

• جهت خرید مسترمیکس پی اف یو | 2xPfu Master Mix کیاژن فناور یا دریافت قیمت مسترمیکس پی اف یو |  2xPfu Master Mix کیاژن فناور کلیک کنید.

مستر 2X SYBR Master Mix چیست وچه کاربردهایی دارد؟

 qPCR 2X Master Mix with SYBR یک کوکتل آماده برای استفاده است که شامل تمام اجزاء به جز پرایمرها و الگو است که برای تولید محصول و تشخیص DNA در qPCR می باشد. ترکیب اصلی شامل Taq DNA پلیمراز هات استارت اصلاح شده شیمیایی، رنگ فلورسنت SYBR Green I، رنگ ROX، ، dNTPs و تثبیت کننده‌ها است. این ترکیب اصلی برای غربالگری واعتبارسنجی PCR Real-time با توان عملکردی بالا ایده آل است.

مستر میکس‌های SYBR® Green با رنگ های دیگر از جمله ROX در دسترس هستند. بسیاری از ماشین های PCR به رنگ مرجع غیر فعال نیاز دارند. یک رنگ مرجع داخلی، مانند ROX، تغییرات نوری را به خوبی تصحیح می کند و برای نرمال سازی سیگنال فلورسنت استفاده می‌شود.

رنگ سبز SYBR یک رنگ اتصال فلورسنت با DNA دو رشته ای dsDNA است که برای ردیابی پیشرفت تکثیر DNA در آزمایش های PCR Real-time استفاده می شود. همانطور که واکنش PCR ادامه می یابد، در هر دور از تولید محصول، رنگ SYBR Green به dsDNA متصل وپلیمریزه می شود، که منجر به افزایش سطح فلورسانس در پایان هر مرحله گسترش می‌باشد. مقدار محصول dsDNA در واکنش متناسب با مقدار فلورسانس است. SYBR Green مهارکننده PCR نیست و نتایج دقیق و قابل تکرار با حساسیت بالا در محدوده دینامیکی گسترده ارائه می‌دهد و نتایج ثابتی را در پلتفرم های مختلف ارائه می‌کند. یکی از مزایای استفاده از مستر SYBR Green در مقایسه با سیستم های تشخیص مبتنی بر پروب، این است که مقرون به صرفه می‌باشد. به طور کلی، پروب های طراحی شده برای PCR، الیگوهایی هستند که یک مولکول فلورسنت در یک سر و یک خاموش کننده در طرف دیگر دارند. هنگامی که اولیگو یک واکنش PCR را آغاز می کند و در محصول PCR گنجانده می‌شود، مولکول فلورسنت دیگر خاموش نمی‌شود. نه تنها SYBR Green عموماً ارزان‌تر از استفاده از پروب است، بلکه می‌تواند با هر ترکیبی از پرایمرها والگوها برای نظارت بر سنتز تمام توالی‌های dsDNA استفاده شود. اکثر سیستم های پروب برای توالی‌های مختلف به پروب های متفاوتی نیاز دارند. عدم نیاز به کاوشگرهای خاص توالی می تواند منجر به زمان آماده سازی آزمایشی کوتاه تر شود.

مستر میکس‌های SYBR Green با هر پروتکل Real-time PCR سازگار هستند. برنامه های کاربردی مستر میکس SYBR Green عبارتند از:

تولید محصولات اسید نوکلئیک

تجزیه وتحلیل بیان ژن

کاربردهای مرتبط با ژنومیک

ژنوتیپ کردن

تشخیص جهش

تشخیص پاتوژن

مستر 2X Probe Taq Master Mix چیست وچه کاربردهایی دارد؟

2X Probe Taq Master Mix محلول‌‌های آماده استفاده هستند که برای quantitative real-time PCR بهینه شده اند. مستر میکس شامل Hot Start Taq DNA Polymerase و dNTPs در بافر PCR بهینه شده است. فقط الگو وپرایمرها باید اضافه شوند. علاوه بر این، مستر با میزان زیاد، کم یا بدون ROX نیز موجود است که عملکرد بهینه را در اکثر ابزارهای رایج real-time PCR مورد استفاده قرار می‌دهد. فقط الگوی DNA، پرایمرها وپروب باید به واکنش اضافه شود. 2x Master Mix با پروب‌های TaqMan بهینه شده است، اما با دیگر پروب‌های شیمیایی مانند Molecular Beacon و Scorpion نیز بهینه شده است. بیشتر روش‌های تشخیص مبتنی بر پروب از انتقال انرژی تشدید شده فلورسنت FRET، با خاموش کردن سیگنال یک گزارشگر فلورسنت در غیاب هدف مورد نظر بهره می‌برند. در طول طویل شدن، مولکول خاموش کننده از گزارشگر فلورسنت جدا می‌شود وسیگنالی منتشر ونظارت می‌شود. تشخیص مبتنی بر پروب به طور قابل توجهی خاص تر است زیرا سیگنال تنها زمانی شناسایی می شود که هدف صحیح تقویت شود.

2X Probe Taq Master Mix در ترکیب با یک بافر بهینه شده، ویژگی و حساسیت PCR را تضمین می کند. dUTP برای کنترل آلودگی انتقال اختیاری با استفاده از اوراسیل DNA گلیکوزیلاز (UDG)) در ترکیب گنجانده شده است. استفاده از 2X Probe Taq Master Mix در real-time PCR، کمیت تکرارپذیر، حساسیت بالا و خاص الگوهای ژنومی، پلاسمید، ویروسی و cDNA را تضمین می کند.

2X Probe Taq Master Mix با اکثر سیکلرهای حرارتی  real-time PCR سازگار است. از ویژگی‌های Hot Start Taq DNA Polymerase وبافر بهینه شده، تولید غیر اختصاصی وتشکیل دایمرهای آغازگر را حذف می کند. حساسیت بالای آن موجب شناسایی تعداد کم کپی محصول هدف می‌شود.

کاربرد آن برای بررسی بیان ژن، تأیید siRNA، ژنوتیپ وتشخیص پاتوژن می‌باشد.

مستر One Step Real time PCR Master Mix چیست وچه کاربردهایی دارد؟

معرف‌های یک مرحله‌ای برای تولید مستقیم نمونه‌های RNA در دستگاه real-time PCR استفاده می‌شوند. مراحل رونویسی معکوس (RT و qPCR) هر دو در یک چاه واکنش انجام می شوند. این کار تعداد دستکاری‌های نمونه مورد نیاز وزمان رسیدن به نتیجه را کاهش می دهد، اما برخلاف استراتژی های دو مرحله ای، تمام cDNA در PCR استفاده می‌شود، بنابراین آرشیو cDNA در دسترس نیست. RT-PCR یک مرحله ای بیشتر برای پردازش نمونه های زیاد در یک زمان، برای یک یا چند هدف در هر نمونه استفاده می‌شود. به عنوان مثال می توان به تشخیص وکمی سازی ویروس، غربالگری بیان ژن با توان عملیاتی بالا، وآزمایش های کمی RNA ساده اشاره کرد. هنگام انجام PCR ریورس ترانسکریپتاز، موفقیت آزمایش‌ها می‌تواند تحت تأثیر عوامل متعددی از جمله الگوی RNA، وجود آلودگی RNase ودمای اتصال قرار گیرد. ترکیب اصلی نوآورانه موجود در کیت‌های RT-PCR یک مرحله‌ای، موجب افزایش اتصال پرایمر در طیف وسیعی از دماها، اختصاصیت وحساسیت بالا در آنالیزهای RT-PCR یک مرحله‌ای را تضمین می‌کند.

دسته ای از این مسترها به گونه‌ای برای RT-PCR طراحی شده است که سریع وبا حساسیت بالا بوده که حتی در حضور مهارکننده های چالش برانگیز موجود در دو فرمول، یکی با رنگ مرجع غیرفعال ROX ودیگری بدون رنگ ارائه شده است.

 One Step RT-PCR Master Mix امکان تجزیه و تحلیل سریع و حساس بیان ژن از بافت ها و سلول ها را فراهم می کند. One Step RT-PCR Master Mix Kit می‌تواند جایگزین روش‌هایی برای تشخیص و تعیین کمیت بیان ژن مانند نورترن بلات، هیبریداسیون درجا، دات بلات، سنجش نوکلئاز S و RT-PCR دو مرحله‌ای معمولی شود.

مستری که حاوی ترکیبی از ترانس کریپتاز معکوس مقاوم در برابر حرارت ومهارکننده ریبونوکلئاز اختصاصی است، بازده بالای cDNA را تضمین می کند.

• جهت خرید مستر میکس پی سی آر کیاژن فناور یا دریافت قیمت مستر میکس پی سی آر کیاژن فناور کلیک کنید.
• جهت خرید One Step Real time PCR Master Mix کیاژن یا دریافت قیمت One Step Real time PCR Master Mix کیاژن فناور کلیک کنید.
• جهت خرید 2xTaq Master Mix | مسترمیکس تگ کیاژن فناور یا دریافت قیمت 2xTaq Master Mix | مسترمیکس تگ کیاژن کلیک کنید.
• جهت خرید مسترمیکس پی اف یو | 2xPfu Master Mix کیاژن یا دریافت قیمت مسترمیکس پی اف یو |  2xPfu Master Mix کیاژن فناور کلیک کنید.
• جهت خرید مستر میکس پروب | 2xProbe Taq Master Mix کیاژن یا دریافت قیمت مستر میکس پروب |  2xProbe Taq Master Mix کیاژن فناور کلیک کنید.
• جهت خرید آنزیم M-MLV Reverse Transcriptase آنزیم ریورس ترانسکریپتاز کیاژن یا دریافت قیمت آنزیمM-MLV Reverse Transcriptase  آنزیم ریورس ترانسکریپتاز کیاژن فناور آریا کلیک کنید.
• جهت خرید کیت سنتز cDNA کیاژن فناور یا دریافت قیمت کیت سنتز cDNA کیاژن کلیک کنید

 One Step Real time PCR Master Mix 2X حاوی Hot Start Taq DNA Polymerase منحصر به فرد، dNTPs،  و تثبیت کننده‌ها در یک بافر بهینه شده است و بازده بالای محصول PCR را با حداقل پس زمینه حتی در صورت استفاده از قالب های کم فراوانی و دشوار فراهم می‌کند. تقویت‌کننده‌های PCR موجود در ترکیب، امکان تقویت کارآمد الگوهای پیچیده از جمله توالی‌های غنی از GC یا AT را فرآهم می‌کنند.

تفاوت مستر 2X Taq Master Mix و مستر 2X Pfu Master Mix چیست ؟

تفاوت اصلی بین Pfu و آنزیم‌های جایگزین این است که Pfu دارای پایداری حرارتی و تصحیح اشتباه بالاتری است. برخلاف Taq DNA پلیمراز، Pfu DNA پلیمراز همچنین دارای فعالیت تصحیح اگزونوکلئاز 3′-> 5′ است که در نتیجه قطعات PCR با خطاهای کمتری نسبت به Taq تولید می شود. دقت Pfu DNA Polymerase تقریباً 10 برابر بیشتر از Taq DNA Polymerase است و برای کاربردهای کلونینگ، توالی یابی و بیان مناسب است.