کیت استخراج RNA ویروسی | (Viral RNA Extraction kit (RENAViro

RENAVIRO

Viral RNA extraction kit

Cat. No: FPKT033.0025

Cat. No: FPKT033.0050

Cat. No: FPKT033.0100

Contents:

Kit storage:

This kit should be stored at room temperature.

Proteinase K and dissolved RNA carrier should be stored at -20 °C

If properly stored, all kit components are stable until the expiration date printed on the label.

Additional Equipment and Reagent required
Absolute ethanol

Standard tabletop microcentrifuge capable of 13,000x g centrifugal force

Microcentrifuge tubes, 1.5 ml, sterile

VTM or PBS

Application

Viral RNA extraction kit is designed for rapid and effective isolation of viral RNA from plasma, serum, cell-free body fluid and cell culture supernatant.

The procedure is optimized to achieve reliable results within 30 min.

Description:

Samples can be fresh or frozen plasma/blood (treated with anticoagulants except heparin), serum, other cell-free body fluids.

The kit allows high yield isolation of viral RNA from nasal or throat swabs.
The kit is specifically designed to isolate high-quality nucleic acids using low elution volumes and allowing sensitive downstream analysis including quantitative PCR and RT-PCR.

The purified RNA is free of proteins and nucleases. Viral RNA extraction kit uses lysis buffer including chaotropic salts to inactivate RNases/DNases and advanced silica-gel membrane technology for fast purification of intact RNA.

Handling Requirements and Safety Information

All solutions are clear and should not be used when precipitates have formed. Warm the solutions at +15 to +25°C or in a 37°C water bath until the precipitates have dissolved.

LR Buffer and WR1 Buffer contain guanidinium hydrochloride which is an irritant.
Do not allow LR Buffer and WR1 Buffer to touch your skin, eyes, or mucous membranes. If contact does occur, wash the affected area immediately with large amounts of water.

If you spill the reagent, dilute the spill with water before wiping it up.
Do not use any modified ethanol.
Do not pool reagents from different lot numbers.
Immediately after usage, close all bottles in order to avoid leakage, varying buffer concentrations or buffer conditions.

After first opening store all bottles in an upright position.
Do not allow the LR Buffer and WR1 Buffer to mix with sodium hypochlorite found in commercial bleach solutions. This mixture can produce a highly toxic gas.

Wear protective disposable gloves, laboratory coats and eye protection, when handling samples and kit reagents.

Do not contaminate the reagents with bacteria, virus, or nucleases. Use disposable pipets and nuclease free pipet tips only, to remove aliquots from reagent bottles.

preparation procedure:

Working Solution Preparation

The RNA purification follows a cell lysis, RNA binding, washing and eluting procedure. Before starting, add Ethanol (Absolute ethanol) to Washing Buffer:

Cat. No: FPKT033.0025              25prep

Add 2.5 ml absolute ethanol to WR1 Bottle

Add 10 ml absolute ethanol to WR2 Bottle

Cat. No: FPKT033.0050              50prep

Add 5 ml absolute ethanol to WR1 Bottle

Add 20 ml absolute ethanol to WR2 Bottle

Cat. No: FPKT033.0100            100prep

Add 10 ml absolute ethanol to WR1 Bottle

Add 40 ml absolute ethanol to WR2 Bottle

Please note that the Ethanol concentration of a Washing Buffer may decrease during long term storage resulting in a drop-down of the final RNA yield.

The provided Lysis Buffer contains carrier molecules to enhance binding of RNA on the column membrane.

If you want to use the whole kit (100 purifications) at the same time, add RNA Carrier and Proteinase K completely to LR buffer bottle and add 366 μl of LR buffer to each sample instead of 350 μl.

before starting Incubate the ER buffer at 55 to 65 ° C until the end of the protocol to obtain the maximum yields.

 

Protocol

1. Sample preparation

1a)

nasal or throat swabs without Viral Transform Media:

Transfer 250 μl of VTM or PBS into a 1.5 ml microcentrifuge tube. Cut off the cotton tip with the collected nasal or throat cells and place it in the microtube. Close the tube and vortex for 15 sec. Incubate at room temperature (20-25 °C) for 10 min. Remove the cotton tip and squeeze it out at the rim of the tube. Transfer 150 µl of VTM or PBS containing the virus into a 1.5 ml microcentrifuge tube. Add 350 µl of LR Buffer. Vortex for 15 sec.

1b)

Preparation from plasma, serum, urine, cell-culture supernantant, cell-free fluid or virus infected tissue and nasal or throat swabs in Viral Transform Media:

Transfer 150 µl plasma, serum, urine, cell-culture supernatant, VTM or PBS containing the virus, cell-free fluid or virus infected tissue into a 1.5 ml microcentrifuge tube. Add 350 µl of LR Buffer. Vortex for 15 sec.

2. To each sample add 6 µl RNA Carrier and 10 μl Proteinase K. incubate the mixture at 58°C for 10 min.
3. Add 500 μl Absolute ethanol to each sample.
4. Insert one High Pure Filter Tube in a Collection Tube.

Pipette entire sample into the upper of the Filter Tube.

Centrifuge the tube assembly 30 sec at 10000 rpm.

5. Discard the flow through liquid. Add 500 μl WR1 to the upper of the Filter Tube and centrifuge 30 sec at 10000 rpm.
6. Discard the flow through liquid. Add 500 μl WR2 to the upper of the Filter Tube. Centrifuge 30 sec at 10000 rpm and discard the flow through.
7. Leave the tube assembly in the centrifuge and spin it for 3 min at maximum speed (approximately 14,000 rpm) to remove any residual Wash Buffer.
8. Discard the Collection Tube and insert the Filter Tube into a clean, sterile 1.5 ml microcentrifuge tube.
9. Add 50 μl ER Buffer to the upper of the Filter Tube. Centrifuge the tube assembly for 1 min at 8,000 rpm.

 to obtain the maximum yields you can add the RNA solution to the top of the filter tube and repeat Centrifuge the tube assembly for 1 min at 8,000 rpm.

The microcentrifuge tube now contains the eluted viral RNA. Either use the eluted RNA directly in RT.PCR or store the eluted RNA at −20°C for later analysis.

مقدمه Viral RNA Extraction kit

(کیت استخراج RNA ویروسی) ویروس ها عوامل بیماری زای کوچکی هستند که وارد سلول های زنده جانداران شده و در آنجا تکثیر می شوند. این ویروس ها می توانند بیماری زا بوده و سبب آسیب به سلول ها شوند. میلیون‌ها نوع ویروس‌ در میان جانداران و در زیستگاه‌ها و مکان‌های مختلف وجود دارد و تا کنون بیش از ۶۰۰۰ گونه مختلف از ویروس‌ها به‌طور دقیق شناسایی و معرفی شده‌اند.

ساختمان عمومی ویروس‌ها شامل اسیدهای نوکلئیک (ژنوم) و پوششی از پروتئین به نام کپسید است.ژنوم ویروس‌ها عبارت است از نوعی اسید نوکلئیک که بر مبنای نوع آن، ویروس‌ها به دو دسته تقسیم می‌شوند: ویروس‌های حاوی RNA و ویروس‌های حاوی DNA.

با آغاز پاندمی کرونا، که عامل ایجاد آن یک ویروس حاوی RNA به نام SARS-CoV-2 است، نیاز به جداسازی و تشخیص ویروس ها به خصوص از بافت های انسانی به طور چشمگیری افزایش یافت.به منظور همگام شدن با نیازهای کشور عزیزمان ایران، شرکت کیاژن فناور آریا موفق به طراحی و تولید Viral RNA Extraction kit از سلول های مخاطی انسان شد.

ویژگی­های کیت استخراج RNA ویروسی

به منظور تشخیص ویروس های حاوی RNA در آزمایشگاه های تشخیص ویروس، در دست داشتن RNA ویروسی با کیفیت و غلظت و خلوص مناسب بسیار حائز اهمیت است. یکی از بهترین و راحت ترین روش های استخراج RNA ویروسی از بافت آلوده، استخراج RNA با کیت های استخراج RNA ویروس از سوآپ آغشته به نمونه ی آلوده به Virus است.

به طور معمول کیت های استخراج RNA ویروسی بر مبنای شکستن دیواره سلول حاوی ویرس و آزاد شدن RNA ویروسی، اتصال RNA ویروسی به یک غشا، شست وشو و حذف سایر اجزا سلولی و در نهایت حل کردن آر ان ای در یک محلول طراحی می شوند.

RNA نهایی باید دارای خلوص بالا بوده و آلوده به سایر اجزای سلولی نباشد، همچنین این نمونه باید کیفیت مناسبی داشته و یکپارچگی آن حفظ شده باشد. مقدار RNA استخراج شده از نمونه ی آلوده که نشان دهنده بازده کیت می باشد نیز بسیار حائز اهمیت می باشد.

کیت استخراج RNA ویروسی (RENAViro) شرکت کیاژن فناور آریا:

کیت استخراج RNA ویروسی تولیدی شرکت کیاژن مدل RENAViro، بر مبنای جداسازی RNA ویروسی با استفاده از غشا سیلیکایی طراحی شده است. این کیت حاوی بافر لیز کننده ی سلول، بافرهای شست و شو، بافر الوشن، حامل RNA و پروتئیناز K می باشد. همچنین 100 عدد ستون سیلیکا و کالکشن تیوب نیز در این کیت موجود است. شما با استفاده از این کیت می توانید از 100 نمونه استخراج RNA انجام دهید.

نمونه ی مورد آزمایش می تواند خلط، سرم، پلاسما، نمونه ی اوروفارنکس و نازوفارنکس انسان باشد.

با استفاده از(Viral RNA Extraction kit (RENAViro می توان RNA کلیه RNA ویروس ها را استخراج کرد.

بازده استخراج RNA ویروسی با (Viral RNA purification kit (RENAViro حدود 40ng/ul می باشد.

در صورتی که نمونه مورد نظر کرونا باشد، در مراحل بعد می توان RNA استخراج شده را  با کیت تشخیص کرونا تولیدی کیاژن فناور آریا یا هر کیت تشخیص Virus استاندارد دیگر تست کرد.

این کیت را می توان به مدت 18 ماه در دمای اتاق نگهداری کرد. پروتئیناز K و حامل RNA باید در فریزر نگهداری شوند.

با افتخار اعلام میداریم کیت استخراج RNA ویروسی RENAViro در سال 1400 موفق به اخذ ایزو 13485 مربوط به تولیدات پزشکی و کلینیکی از مرجع IMQ ایتالیا شد.

چرا کیت استخراج RNA ویروسی مورد نیاز خود را از شرکت کیاژن فناور آریا بخریم؟

با نگاهی ساده به جدول های زیر می توانید کیت استخراج RNA ویروسی تولیدی کیاژن فناور آریا را با شرکت های داخلی و خارجی مقایسه کنید.

مقایسه کیت استخراج RNA ویروسی 100 تستی شرکت کیاژن فناور آریا با شرکت های تولیدکننده داخلی
نام شرکت	کیاژن فناور آریا	شرکت رقیب داخلی 1	شرکت رقیب داخلی 2
قیمت	800.000 تومان	1.400.000تومان	1.800.000تومان
زمان تحویل	فوری(همان روز ثبت سفارش)	2-3 روز	2-3 روز
کیفیت	بالا	بالا	بالا

مقایسه کیت استخراج RNA ویروسی 100 تستی شرکت کیاژن فناور آریا با شرکت های معتبر خارجی
نام شرکت	کیاژن فناور آریا	OMEGA	qiagen
قیمت	800.000 تومان	5.600.000 تومان	17.340.000 تومان
زمان تحویل	فوری(همان روز ثبت سفارش)	1 ماهه	1 ماهه
هزینه ارسال	حداقل هزینه(بسته به مسافت)	زیاد(هزینه گمرکی علاوه بر مسافت)	زیاد(هزینه گمرکی علاوه بر مسافت)
سایر موارد	تضمین رعایت شرایط دمایی حمل مناسب محصول	نگرانی از رعایت شرایط دمایی و حمل مناسب محصول به علت بعد مسافت زیاد	نگرانی از رعایت شرایط دمایی و حمل مناسب محصول به علت بعد مسافت زیاد
کیفیت	بالا	بسیار بالا	بسیار بالا

از RENAViro کیاژن فناور آریا چه استفاده ای می شود؟

با استفاده از این کیت می توان 100 نمونه استخراج RNA انجام داد.

نمونه ی مورد آزمایش می تواند خلط، سرم، پلاسما، نمونه ی اوروفارنکس و نازوفارنکس انسان باشد.

با استفاده از Viral RNA purification kit می توان RNA کلیه RNA ویروس ها را استخراج کرد.

بازده استخراج RNA ویروسی با (Viral RNA Extraction kit (RENAViro حدود 40ng/ul می باشد.