مخلوط دی ان تی پی|dNTP mixture

DNTPs (deoxynucleotide triphosphates) are the building blocks of DNA, which are used in various molecular biology techniques, such as PCR, DNA sequencing, and gene expression analysis.

In PCR, DNTPs are used to synthesize new DNA strands during the extension phase of each cycle. The four types of DNTPs (dATP, dCTP, dGTP, and dTTP) are added to the reaction mixture in equimolar amounts to ensure proper base pairing and extension of the primers.

In DNA sequencing, DNTPs are used as substrates for DNA polymerase during the synthesis of the complementary strand of DNA. The incorporation of fluorescently labeled DNTPs enables the detection of the nucleotide sequence during the sequencing process.

In gene expression analysis, DNTPs are used to synthesize cDNA (complementary DNA) from RNA templates during reverse transcription. The cDNA can then be amplified using PCR and analyzed to determine the levels of gene expression.

Overall, DNTPs are essential reagents in many molecular biology techniques, as they serve as the building blocks for DNA synthesis. Their availability in pure form and in equimolar amounts is critical for accurate and efficient DNA synthesis, making them a fundamental component in many molecular biology workflows.

مقدمه dNTP :

dNTP در واقع مخفف دئوکسی ریبونوکلئوتید تری فسفات است. دئوکسی نوکلئوتید تری فسفات ها (dNTPs) حاوی قند دئوکسی ریبوز می باشند.

دی ان تی پی ها بلوک های اصلی سازنده DNA هستند و در طول همانندسازی DNA دو گروه از گروه های فسفات خود را هنگام ترکیب شدن با DNA از دست می دهند. هر dNTP از یک گروه فسفات، یک قند دئوکسی ریبوز و یک پایه نیتروژنی تشکیل شده است.

به طور کلی می توان دی ان تی پی ها را به دو گروه اصلی پورین ها و پیریمیدین ها تقسیم کرد. دی ان تی پی های پورینی شامل ddGTP و ddATP و dNTP های پیریمیدینی شامل ddTTP  و ddCTP می باشند.

کاربردهای DNTP

DNTPs (deoxynucleotide triphosphates)، سازنده‌های DNA هستند که در تکنیک‌های مولکولی بیولوژی، مانند PCR، توالی‌یابی دی‌ان‌ای و تجزیه و تحلیل بیان ژنی، استفاده می‌شوند.

در PCR، DNTPs برای ایجاد رشته های DNA جدید در مرحله تمدید هر چرخه استفاده می‌شوند. چهار نوع DNTP (dATP، dCTP، dGTP و dTTP) در مقادیر معادل به محل واکنش افزوده می‌شوند تا ترکیب پایه‌ای و تمدید پرایمرها به درستی انجام شود.

در توالی‌یابی دی‌ان‌ای، DNTPs به عنوان ماده اولیه برای پلیمراز دی‌ان‌ای در طول سنتز‌ رشته مکمل DNA به کار می‌روند. وارد شدن DNTPs با برچسب نورانی امکان تشخیص توالی نوکلئوتیدها در طول فرایند توالی‌یابی را فراهم می‌کند.

در تجزیه و تحلیل بیان ژنی، DNTPs برای تولید cDNA (DNA مکمل) از قالب‌های RNA در طول ترجمه معکوس استفاده می‌شوند. پس از تکثیر cDNA با استفاده از PCR، میزان بیان ژنی مورد بررسی قرار می‌گیرد.

کلیتاً، DNTPs به عنوان مواد اولیه ضروری در بسیاری از تکنیک‌های مولکولی بیولوژی عملکرد دارند، زیرا به عنوان سازنده‌های ترکیبی برای سنتز DNA عمل می‌کنند. در دسترس بودن آنها در فرم خالص و در مقادیر معادل، برای سنتز دقیق و کارآمد DNA ضروری است، که آنها را به عنوان یک قسمت اساسی در بسیاری از جریان‌های کاری مولکولی بیولوژی می‌سازد.

ویژگی­های مخلوط دی ان تی پی|dNTP mixture:

عملکرد:

میزان چهار dNTP ی موجود در هسته و محتوای سلولی کامل با روش آنزیمی اندازه‌گیری شد و انواعی از آن ها هم در سیتوپلاسم و هم در هسته یافت شد، اما توزیع دی ان تی پی ها در دو محل هسته و سیتوپلاسم متفاوت بود. نوکلئوتیدها به ویژه برای همانندسازی DNA و رونویسی RNA در مراحل تقسیم سریع ضروری هستند و همچنین در تامین منابع انرژی سلولی (ATP و GTP) ضروری می باشند و در بسیاری از عملکرد های متابولیکی دیگر نیز نقش دارند.

هدف اصلی استفاده از dNTPها سنتز رشته DNA جدید است، دی ان تی پی ها با استفاده از الگوی یک طرفه، نوکلئوتیدها را به رشته “زیپ نشده” ارائه می دهند و بدین صورت رشته DNA را به دو رشته تبدیل می‌کنند و تا زمانی که معرف‌ها تا مرحله نگهداری نهایی باقی می‌مانند، این فعالیت به صورت تصاعدی ادامه می یابد.

فعالیت:

مخلوط دی ان تی پی|dNTP mixture در PCR که یک تکنیک in vitro برای سنتز DNA است، جهت گسترش رشته DNA در حال رشد استفاده می شوند. عملکرد dNTP ها در PCR گسترش رشته DNA در حال رشد با کمک آنزیم های پلیمرازی است که با پیوندهای هیدروژنی به رشته DNA مکمل متصل می شوند.

مخلوط دی ان تی پی|dNTP mixture شرکت کیاژن فناور آریا:

dNTP Mix شرکت کیاژن فناور آریا محلولی حاوی هر 4 نوکلئوتید dATP، dCTP، dGTP و dTTP است که غلظت هر کدام از آن ها 2.5 میلی مولار و غلظت کل نوکلئوتیدها 10 میلی مولار می باشد. این محلول قابل استفاده در همه ی انواع PCRها و سازگار با هردو آنزیم Taq DNA Polymerase و Pfu DNA Polymerase و دیگر پلیمراز ها و کیت های سنتز cDNA می باشد.

از dNTP کیاژن فناور آریا چه استفاده ای می شود کرد؟

شما با داشتن رشته ی DNA الگو، به کمک مخلوط dNTP شرکت کیاژن فناور آریا که محلولی از هر 4 نوکلئوتید dATP، dCTP، dGTP و dTTP می باشد همراه با کیت های Taq DNA Polymerase و یا Pfu DNA Polymerase میتوانید واکنش PCR مورد نظر خود را به راحتی انجام دهید.